乳液提取試劑盒成分

外泌體是細(xì)胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過(guò)三種方式介導(dǎo)細(xì)胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細(xì)胞相互作用,通過(guò)受體–配體作用黏附到靶細(xì)胞表面,隨后被內(nèi)吞入靶細(xì)胞,或直接將內(nèi)容物釋放到靶細(xì)胞內(nèi),從而激huo靶細(xì)胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產(chǎn)生的片段可以與靶細(xì)胞的細(xì)胞表面受體結(jié)合,從而激huo靶細(xì)胞;(3)外泌體還可以與靶細(xì)胞直接接觸發(fā)生膜融合,導(dǎo)致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉(zhuǎn)移到目標(biāo)細(xì)胞,從而引起靶細(xì)胞的響應(yīng)。通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過(guò)程,比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞或髓樣細(xì)胞以抑制免疫反應(yīng),而且還可以參與疾病形成的病理過(guò)程,如通過(guò)與受體細(xì)胞的相互作用傳播病原物質(zhì)、促進(jìn)中流轉(zhuǎn)移過(guò)程中的血管生長(zhǎng)和中流細(xì)胞遷移。外泌體可以直接進(jìn)入受體細(xì)胞影響細(xì)胞功能。乳液提取試劑盒成分

利用蛋白質(zhì)免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可以對(duì)外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一，操作時(shí)往往需要細(xì)胞裂解液作為陰性對(duì)照。常用的外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白質(zhì)CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白(Alix)等，內(nèi)參蛋白質(zhì)可以是肌動(dòng)蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶，陰性對(duì)照蛋白可以是阻抑素(PHB，線粒體標(biāo)志蛋白)或鈣聯(lián)結(jié)蛋白Calnexin。在酶聯(lián)免疫吸附析法中，外泌體裂解液通過(guò)固載有抗體的固相基質(zhì)，隨后與檢測(cè)抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)的問(wèn)題，相比較而言，酶聯(lián)免疫吸附分析法比蛋白質(zhì)免疫印跡法更加快速，適用于高通量分析。羊水提取試劑盒外泌體的提取的方式：PS親和法。

外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細(xì)胞的增殖、再生和遷移等生理過(guò)程，在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用，如肝病、肝硬化、肝纖維化、酒精性脂肪肝等。抑制或阻止外泌體的分泌，或許是治理肝臟疾病的一種新型策略。此外，外泌體具有穩(wěn)定性和生物安全性，也可以用作載體攜帶改造的基因或藥物，或用作疫苗誘導(dǎo)免疫反應(yīng)殺死瘤細(xì)胞。外泌體會(huì)起到一定的保護(hù)作用，抵抗病毒的作用。與HCV類似，HBV患者的血清中分離到的外泌體同樣攜帶HBV核酸分子和蛋白質(zhì)。HBV陽(yáng)性的外泌體會(huì)主動(dòng)轉(zhuǎn)移HBV到肝細(xì)胞中。外泌體中HBV核酸分子還會(huì)抑制RIG-1和下游信號(hào)通路，導(dǎo)致NK細(xì)胞功能紊亂。

有研究表明外泌體通過(guò)喚醒瘤相關(guān)信號(hào)通路、誘導(dǎo)免疫耐受、重塑細(xì)胞外基質(zhì)、增強(qiáng)瘤細(xì)胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進(jìn)瘤的發(fā)生和發(fā)展，外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢(shì)：外泌體可保護(hù)其中的核酸類物質(zhì)，防止其迅速降解；外泌體的形成與親源細(xì)胞的狀態(tài)密切相關(guān)；針對(duì)外泌體內(nèi)容物的檢測(cè)比傳統(tǒng)的瘤標(biāo)志物更具有特異性；外泌體寬泛存在于多種體液樣本中，以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過(guò)程中及時(shí)監(jiān)測(cè)分子標(biāo)志物的變化，這種檢測(cè)更易監(jiān)控且樣本更易收集。目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。

除運(yùn)輸藥物進(jìn)行疾病zhiliao之外，外泌體還能進(jìn)行免疫zhiliao，外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)時(shí)，外泌體通常運(yùn)載TGF-β1、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì)。在這些研究中，分泌外泌體的母代細(xì)胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細(xì)胞或者中流細(xì)胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細(xì)胞作為母代細(xì)胞，通過(guò)熱處理的方式使淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子，如主要組織相容性復(fù)合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等，與未熱處理的鼠B淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體相比，熱處理后分泌的外泌體可以增強(qiáng)對(duì)T細(xì)胞的激huo能力，從而增強(qiáng)這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。外泌體的直徑比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm。羊水提取試劑盒

疾病的進(jìn)展和對(duì)診療的反應(yīng)可以通過(guò)外泌體的多組分分析來(lái)確定。乳液提取試劑盒成分

流式細(xì)胞技術(shù)針對(duì)外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強(qiáng)反射，操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM)，將可檢測(cè)的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測(cè)，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)，目前該儀器已商品化。乳液提取試劑盒成分

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