唾液外泌體

外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素。外泌體的提取分離方法：PEG-base沉淀法。唾液外泌體

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報道，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2、在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理；迄今為止，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑。然而，比較明顯，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。吉林外泌體NTA隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域。

外泌體的基本信息：1、外泌體的大?。和饷隗w的直徑約40-150nm。2、從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。3、外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。4、外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm。5、外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個。6、外泌體的細(xì)胞源：人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體。7、外泌體具有異質(zhì)性，即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別。8、外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中。9、外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體。

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細(xì)胞的吞噬作用或降解，還可以在體內(nèi)長時間循環(huán)，保持效果。其中，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。外泌體具有相似布朗運(yùn)動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)干擾。

細(xì)胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中分離出的診療性外泌體可對靶細(xì)胞產(chǎn)生特定的作用，包括新抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞。診療性外泌體對靶細(xì)胞的影響可能是通過不同的進(jìn)入或相互作用機(jī)制來控制的。完整的外泌體的進(jìn)入可能包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞飲作用。外泌體內(nèi)容物的進(jìn)入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合，從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細(xì)胞質(zhì)中。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。吉林外泌體NTA

外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層。唾液外泌體

尺寸排阻色譜法（SEC）根據(jù)大小來分離樣本。該技術(shù)應(yīng)用了一個裝有多孔聚合物珠的色譜柱，該聚合物珠包含多個孔和通道，分子根據(jù)其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時間，而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相比，SEC分離的外泌體不受剪切力的影響，剪切力可能會改變囊泡的結(jié)構(gòu)。此方法分離到的外泌體純度較高，在電鏡下大小均一，但是獲取量少，所需設(shè)備特殊。此外，SEC方法與超濾相結(jié)合已被用于尿液來源的外泌體的分離和分析。唾液外泌體

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