體液外泌體提取試劑盒服務

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結構的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質質和脂質等，存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉移核酸、蛋白質、脂質等特定物質，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、腫細胞細胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉導過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。體液外泌體提取試劑盒服務

細胞外囊泡是蛋白質、mRNA、miRNA和脂質運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡，由多種細胞分泌，內含有特定的蛋白質、脂質、細胞因子或遺傳物質。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子，而且還包含其行使功能的關鍵分子。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應用已經(jīng)涉及瘤子診療領域、醫(yī)學基礎和免疫領域、寄生蟲領域；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體抗體外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)。

根據(jù)內侵量的不同，可以產生不同尺寸、不同含量的ILV。LSEs產生的MVBs具有確定的ILV聚集(未來的外泌體)。MVBs可以與自噬體融合，較終其內容物在溶酶體中降解。降解產物可被細胞回收利用。MVBs也可以直接與溶酶體融合降解。不遵循這一軌跡的MVBs可通過細胞骨架和微管網(wǎng)絡轉運至質膜，借助mvb-停靠蛋白?？吭谫|膜的腔側。隨后胞吐導致具有與質膜相似的脂質雙分子層方向的外泌體的釋放。有幾種蛋白參與了外泌體的生物發(fā)生，包括RabGTPases、ESCRT蛋白，以及其他也被用作外泌體標記的蛋白(CD9、CD81、CD63、flotillin、TSG101、神經(jīng)酰胺和Alix)。

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質（如細胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質，在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。由于外泌體的特殊結構和功能，使得它具有潛在的應用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標，另一方面也可以作為診療手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究，應選用血漿還是血清？答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了比較多凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。

細胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細胞、成纖維細胞和間充質細胞中分離出的診療性外泌體可對靶細胞產生特定的作用，包括新抗原呈遞、免疫調節(jié)和藥物有效載荷傳遞。診療性外泌體對靶細胞的影響可能是通過不同的進入或相互作用機制來控制的。完整的外泌體的進入可能包括受體介導的內吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞飲作用。外泌體內容物的進入或外泌體信號的誘導可能涉及配體受體誘導的細胞內信號或融合，從而將外泌體內容物沉積到細胞質中。外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體，是具有生物活性的脂雙層囊泡。上清液提取試劑盒報價

外泌體在免疫調控、肉瘤轉移和血管生成以及生物標志物等領域發(fā)揮著非常重要的作用。體液外泌體提取試劑盒服務

常規(guī)生物學實驗中，實時定量PCR技術（RT-PCR）普遍用于microRNA的檢測實踐中，但外泌體樣品中的microRNA豐度極低，普通RT-PCR技術的靈敏度已經(jīng)不能夠滿足。第三代微滴式數(shù)字PCR——ddPCR技術，成為外泌體microRNA檢測的選擇技術。微滴式數(shù)字PCR（DropletdigitalPCR），又成為“油包水PCR”，在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。體液外泌體提取試劑盒服務

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