液體培養(yǎng)基：為確定液體培養(yǎng)基的生長率，應接種適當?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后，北京Systec培養(yǎng)基制備器，計數(shù)或計算液體培養(yǎng)基分數(shù)而得出其生長數(shù)量的。對于液體培養(yǎng)基定性測試方法，則通過肉眼觀察來實現(xiàn)。目標菌和非目標菌的定量稀釋法步驟如下：選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標菌：將少量測試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標準肉湯，混勻，北京Systec培養(yǎng)基制備器。接種非目標菌：將大量測試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標準肉湯，北京Systec培養(yǎng)基制備器，混勻。培養(yǎng)基制備器完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。北京Systec培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的配制：1、配料：在容器中加入少量水，按照配方稱取各種藥品，加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。2、溶解：淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀，加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調(diào)PH：用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4、過濾：濾紙或棉花進行過濾。5、分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶：若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，較多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。(2)試管分裝：液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養(yǎng)成分會被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。北京Systec培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析，是設計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。

培養(yǎng)基的制備：（1）稱量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;（2）溶解：用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;（3）分裝：根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5（需根據(jù)試管的大小而定）.液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.（4）塞硅膠塞：裝好培養(yǎng)基的試管應塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內(nèi),這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無菌水的制備：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中.（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶內(nèi),防止暴沸.（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。

微生物限度:細胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品，其中的微生物在一定條件下會吸收細胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖，導致細胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效�？刂萍毎�培養(yǎng)基中細菌和霉菌，是延長細胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當?shù)厮幍洹?005版二部附錄第100頁的口服給藥制劑的微生物限度標準，并嚴于該標準，規(guī)定細胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細菌數(shù)每1g不得超過200個，霉菌數(shù)每1g不得超過50個。稱取樣品1g，加入無菌純化水10mL溶解，混勻即得試樣。按中華人民當?shù)厮幍?005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行，檢查項目為細菌數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。培養(yǎng)基制備器分裝好的培養(yǎng)基應立即進行滅菌。

培養(yǎng)基配置原則：原料來源的選擇，在配制培養(yǎng)基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。例如，在微生物單細胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。培養(yǎng)基的實驗室制備：正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。北京Systec培養(yǎng)基制備器

全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：具有快速升溫和迅速冷卻功能。北京Systec培養(yǎng)基制備器

溶化：培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂，培養(yǎng)基不需要加熱；如果含有瓊脂，則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸，完全溶解后，再補齊所需水，并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大，可用不銹鋼鍋加熱溶化，可先用溫水加熱并隨時攪動，防止焦化，如有焦化現(xiàn)象，配制的培養(yǎng)基就不能使用，要重新配制。配制培養(yǎng)基時不可用銅或鐵的容器溶化，因銅或鐵制容器可能會使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標，影響實驗（培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L，細菌不宜生長，鐵含量超過0.14mg/L，妨礙細菌產(chǎn)有害）。對容易發(fā)生反應，產(chǎn)生沉淀的藥品，要分開溶解，較后加入培養(yǎng)基，如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。北京Systec培養(yǎng)基制備器

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