培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.pH的測定和調(diào)整：用pH計測定pH,必要時在滅菌前調(diào)節(jié)pH，除特殊說明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時，黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器,要求pH的變化不超過0，黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH，溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時，黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器,滅菌前無需調(diào)節(jié)pH。2.分裝：將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦�，容器的體積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基pH值不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)的問題：出現(xiàn)此類情況有很多原因，生物大致分為①廠家質(zhì)量：出廠時pH不穩(wěn)定。②滅菌問題：是蒸壓過高或殺菌時間過長，導(dǎo)致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存時間超過保質(zhì)期或結(jié)塊水的質(zhì)量有問題。④水質(zhì)問題：采用去離子水/蒸餾水/純凈水等，不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度：儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因，可逐一檢查排除解決問題。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。青海培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：不會產(chǎn)生氣泡。

培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細(xì)菌、及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進(jìn)行驗(yàn)證，后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作（至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次）。另外，應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開，并有各自獨(dú)自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室，有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓，防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞（尤其是細(xì)胞庫）的污染。

培養(yǎng)基的性能測試：1.外觀控制：制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制：從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測試(無菌試驗(yàn))，確定無微生物生長方可使用。3.性能測試：(1)測試菌株選擇：測試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法（改進(jìn)的劃線法接種法）。(4)定性測試方法（平板接種觀察法）。用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物，在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時才能良好生長。

倒平板:滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻到50℃左右后，倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)基的溫度不能過高，否則容易在培養(yǎng)皿的內(nèi)蓋上形成太多的冷凝水；溫度太低，培養(yǎng)基又容易凝固成塊，無法制成平板。倒平板時，應(yīng)在靠近酒精燈火焰進(jìn)行，以免外界的雜菌落入平板內(nèi)，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿三角瓶的底部，用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下，灼燒瓶口，用大拇指和食指把培養(yǎng)皿蓋打開一條縫，至瓶口剛好伸入，倒入培養(yǎng)基，以鋪滿底為限，不超過培養(yǎng)皿高度的三分之一，迅速蓋好蓋，放在桌面上，輕輕地轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基分布均勻，冷凝后即可。平板培養(yǎng)基要除去冷凝水，否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。青海培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，。黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.過濾滅菌:過濾滅菌可以在真空負(fù)壓或正壓條件下進(jìn)行。使用無菌設(shè)備和0.2um孔徑的濾膜。將過濾裝置的各個部分消毒滅菌,或使用預(yù)消毒設(shè)備。一些濾膜上附著蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)()。為達(dá)到有效過濾,應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤濕。2.監(jiān)測:應(yīng)對經(jīng)濕熱或過濾滅菌的培養(yǎng)基進(jìn)行監(jiān)測,尤其要對pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測。添加劑的制備:制備含有有毒物質(zhì)(生素）時應(yīng)小心操作，避免因粉末的擴(kuò)散造成實(shí)驗(yàn)人員過敏或發(fā)生其他不良反應(yīng)。采用適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施并小心按照產(chǎn)品使用說明操作。黑龍江培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

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