制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（2）倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀，湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下，湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板了。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分。湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀

培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn)。每次使用前后，均要對分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，在分裝無菌培養(yǎng)基前，則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿：傾注平皿，應(yīng)在無菌室中放置3一4h，如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30一60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細(xì)玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基，如沾有培養(yǎng)基應(yīng)用布抹去，以避免污染。湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀培養(yǎng)基根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的類別按照培養(yǎng)基的成分來分：培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類。(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是己知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，組成成分精確，重復(fù)性強(qiáng)，但價格較貴，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等。(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，所以常被采用。(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。

培養(yǎng)基的滅菌：一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中，如無特殊規(guī)定，即可用此法滅菌。某些熱敏成分，如糖類，應(yīng)另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和等則應(yīng)以無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出，冷至55℃-60℃時，擺置成適當(dāng)斜面，待其自然凝固。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。

微生物培養(yǎng)基：根據(jù)微生物類型和培養(yǎng)基的組成，微生物培養(yǎng)基通�？梢苑譃椋合薅ㄅ囵B(yǎng)基、復(fù)雜培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基。在確定的培養(yǎng)基中，確切的化學(xué)成分是已知的。這些類型的培養(yǎng)基通常由純生化物質(zhì)組成，通常用于研究微生物的較低營養(yǎng)需求。相比之下，復(fù)雜介質(zhì)的確切化學(xué)成分尚不清楚。復(fù)雜介質(zhì)培養(yǎng)基類型通常包含生物來源的試劑，例如酵母提取物和蛋白胨，其中確切的化學(xué)成分未知。復(fù)雜培養(yǎng)基通常提供多種生長因子，有助于未知和挑剔的細(xì)菌物種的培養(yǎng)。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH，還須進(jìn)行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀

液體培養(yǎng)基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀

馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過程：(1)稱量和熬煮：按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解：把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉網(wǎng)上，小火加熱，并用玻棒不斷攪拌，以防瓊脂糊底或溢出，待瓊脂完全溶解后，再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝：按實(shí)訓(xùn)要求，將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量：固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5，滅菌后制成斜面，分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等)，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染，并保證有良好的通氣性能。湖北進(jìn)口培養(yǎng)基制備儀

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